絕大多數(shù)蛋白質(zhì)會通過與其它蛋白質(zhì)的相互作用來維持適當(dāng)?shù)纳锘钚浴＠肈uolink，您可以檢測、定量以及可視化蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用、單一目標(biāo)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平以及翻譯后修飾的過程。相較于傳統(tǒng)蛋白質(zhì)檢測方法，Duolink技術(shù)的優(yōu)勢在于：能夠充分利用抗體的選擇性（特異性）與核酸擴增的靈敏性，在蛋白質(zhì)的天然狀態(tài)對其進(jìn)行可視化檢測。

無需過表達(dá)蛋白質(zhì)，可對單個相互作用進(jìn)行可視化檢測

在內(nèi)源水平定量檢測微弱的和瞬時性的相互作用

利用兩個一抗的結(jié)合獲得高特異性

通過信號放大獲得單分子級靈敏度

可利用標(biāo)準(zhǔn)的免疫熒光儀器進(jìn)行結(jié)果分析

適用于細(xì)胞水平的高通量篩選

 

蛋白-蛋白相互作用

許多重要的生物過程是由蛋白-蛋白相互作用所形成的蛋白質(zhì)復(fù)合物所決定的，比如DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、剪接、分泌、細(xì)胞周期調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，以及中間代謝等過程。與其他蛋白質(zhì)的相互作用也可能會改變蛋白自身的功能和活性。基于對了解疾病相關(guān)信號通路的興趣，研究人員開始研究蛋白質(zhì)與多種細(xì)胞組分進(jìn)行相互作用的原理,確定蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用是瞬時的還是穩(wěn)定的則是至關(guān)重要的環(huán)節(jié).。使用Duolink可以讓你對穩(wěn)定、微弱及瞬時的內(nèi)源性蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)行可視化研究。

翻譯后修飾

蛋白質(zhì)間的相互作用往往依賴一種或兩種蛋白質(zhì)的修飾狀態(tài)。翻譯后修飾（post-translational modifications, PTM）是指蛋白質(zhì)在核糖體中翻譯完成之后，在蛋白質(zhì)合成過程中的共價及酶促修飾過程。涉及到調(diào)節(jié)功能和結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)研究的翻譯后修飾過程包括：磷酸化、糖基化、酰化、硫酸鹽化及泛素化。對翻譯后修飾進(jìn)行歷史性分析需要用到多種技術(shù)，包括：凝膠電泳、質(zhì)譜、高效液相色譜法和免疫組化。Duolink技術(shù)使您能夠在固定的細(xì)胞和組織中，對內(nèi)源性修飾過程進(jìn)行可視化的研究。 了解更多關(guān)于翻譯后修飾的內(nèi)容請點擊此處。

低豐度蛋白質(zhì)

在真實的疾病生物學(xué)研究中，對天然狀態(tài)的蛋白質(zhì)進(jìn)行研究至關(guān)重要。然而，給定樣品中的蛋白質(zhì)濃度會有一個寬動態(tài)變化范圍。傳統(tǒng)的做法是，如果需要在天然狀態(tài)下對蛋白質(zhì)進(jìn)行研究，必需對目的蛋白質(zhì)進(jìn)行過表達(dá)、標(biāo)記或遺傳修飾。使用Duolink可以讓你對單個蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間相互作用的內(nèi)源表達(dá)水平進(jìn)行檢測。

蛋白質(zhì)定位

蛋白質(zhì)定位涉及蛋白質(zhì)在細(xì)胞中存在位置的計算預(yù)測。在亞細(xì)胞水平了解蛋白質(zhì)的定位，有利于更好地了解蛋白質(zhì)功能、蛋白質(zhì)相互作用機制，以及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。研究內(nèi)源蛋白質(zhì)定位的傳統(tǒng)技術(shù)經(jīng)常會出現(xiàn)脫靶結(jié)合及與其他蛋白質(zhì)的交叉反應(yīng)。Duolink能夠利用二抗系統(tǒng)，提高目的蛋白質(zhì)的識別特異性和靈敏性。

數(shù)字化定量

在定量過程中，可以對細(xì)胞和組織的圖像進(jìn)行分析。通過細(xì)胞核的自動檢測，以及細(xì)胞質(zhì)大小的估算，研究者能夠?qū)M織或細(xì)胞群中的蛋白質(zhì)表達(dá)水平進(jìn)行單細(xì)胞統(tǒng)計學(xué)分析。另外，研究人員還可以自定義研究目的區(qū)域——這一特征對組織樣品的研究特別適用。來源于奧林巴斯、徠卡、尼康或蔡司品牌顯微鏡的原始圖片（TIFF或JPG格式）可以導(dǎo)入數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可以非常輕松地輸出為Microsoft Excel文件，以供進(jìn)一步分析評估。