什么是封閉血清?
封閉血清就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動(dòng)物采血,然后不加抗凝劑,血液凝固,血-塊收縮,析出的淡黃色液體。經(jīng)過(guò)特殊工藝處理后的血清,特別適在各類免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于封閉處理, 比如:IHC、IF/ICC、ELISA等。
血清與血漿的區(qū)別?
血漿是指血液中除去細(xì)胞成分后剩下的淡黃色或無(wú)色半透明液體,一般需要經(jīng)過(guò)抗凝處理 。血清與血漿的區(qū)別在于血清中不含某些在凝血過(guò)程中被消耗的凝血因子如纖維蛋白原,增添了在血液 凝固過(guò)程中由血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板所釋放的化學(xué)物質(zhì)。
為什么需要封閉?
封閉步驟可減少一抗和二抗與非靶標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行非特異性結(jié)合時(shí)所產(chǎn)生的本底信號(hào)。理想情況是,封閉劑將占據(jù)樣本中的“黏性”位點(diǎn),比如暴露的帶電性或疏水性蛋白表面,同時(shí)不會(huì)干擾一抗/二抗識(shí)別靶表位,從而盡可能提高信噪比(S/N)。
用封閉血清效果好嗎?
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉??梢苑忾]待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn),另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點(diǎn),阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽(yáng)性。對(duì)于適用多抗的實(shí)驗(yàn),二抗種屬來(lái)源的正常血清是封閉處理的金標(biāo)準(zhǔn)。
為什么會(huì)推薦遠(yuǎn)慕生物的封閉血清?
作為生命科學(xué)領(lǐng)域?qū)I(yè)的產(chǎn)品,遠(yuǎn)慕生物科技始終秉承著只推對(duì)的,不推貴的原則,為您提供高性價(jià)比產(chǎn)品,加速科研成果。我司封閉血清有如下優(yōu)勢(shì):
1、 高品質(zhì):正常的血清是從未免疫的正常成年宿主體內(nèi)采集的血液,經(jīng)脂質(zhì)萃取和透析加工而成。血液采集和血清提取過(guò)程中采用專-利技術(shù),極大地避免了溶血的發(fā)生。
2、 用途廣泛:IHC、ICC、IF、ELISA。
3、 適用便捷:液體形式產(chǎn)品(原液),無(wú)需溶解,適用PBS直接稀釋即可使用。
4、 質(zhì)量穩(wěn)定:在-20℃保存的話,一般都是可以放2-3年。
5、 配方優(yōu)良:與其它進(jìn)口品牌比,減少了一倍的防腐劑含量,對(duì)細(xì)胞和蛋白的毒性/影 響更小。
6、 種屬全:提供全套種屬的封閉血清,滿足絕大多數(shù)客戶的需求。
7、 現(xiàn)貨供應(yīng):大量現(xiàn)貨儲(chǔ)備,確保貨期時(shí)效性。
8、性價(jià)比高:買得起的高品質(zhì)產(chǎn)品
封閉血清如何使用?
推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上,37℃度孵育10-30分鐘,清除血清,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。
實(shí)用:
1、jia的稀釋比例需研究者通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。建議的起始稀釋比例如下:IHC-p(1:10-20);IF / ICC(1:10-20);ELISA(1:100)。
2、封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白,且與一抗來(lái)源不同,可用與二抗相同來(lái)源的封閉血清。
3、封閉結(jié)束后,用濾紙吸去血清,不洗,直接滴加一抗。
4、 每張切片需要量,可以參考50ul PBS + 5ul 血清 來(lái)計(jì)算。
5、如何如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損:
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2~8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。如果開(kāi)蓋后未使用完,我們建議存放于4℃,但請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。