1、問(wèn)：懷疑購(gòu)買的Gibco胚胎干細(xì)胞專用胎牛血清（Gibco ES專用胎牛血清）染菌，想用濾膜過(guò)濾一下，可否自己用0.22μm濾膜過(guò)濾？對(duì)血清性質(zhì)有多大影響？有做過(guò)的么？

　　答：可以過(guò)濾的，血清當(dāng)出廠時(shí)都是0.22μm或0.1μm過(guò)濾除菌。想證明有沒(méi)有染菌不用過(guò)濾這么麻煩，只要放置于37℃過(guò)夜就可以了，如果有微生物污染會(huì)變渾濁的，如果還是澄清的就說(shuō)明沒(méi)有問(wèn)題的。實(shí)驗(yàn)室中血清很難直接過(guò)濾，一般要加到培養(yǎng)基中再過(guò)濾。我們實(shí)驗(yàn)室制備培養(yǎng)基時(shí)，都使用濾膜過(guò)濾，一般而言如果制備1-2瓶培養(yǎng)基，一個(gè)濾膜及一支30ml注射器可以過(guò)濾50ml小牛血清。如果大量制備培養(yǎng)基也可以將血清加到培養(yǎng)基中，使用0.22微米的大濾膜一起過(guò)濾。

　　2、問(wèn)：我懷疑我用的*1640培養(yǎng)液被污染了，準(zhǔn)備重新過(guò)濾消毒，過(guò)濾后是否需要補(bǔ)充胎牛血清？如需又如何補(bǔ)充？

　　答：*1640培養(yǎng)液被污染了，如果是支原體的話，過(guò)濾沒(méi)有作用，支原體可以通過(guò)濾膜。我們用1640液，都是配液后保留500ml，然后其他的分裝100-200ml，現(xiàn)用現(xiàn)配因?yàn)檠灞?640要貴，如果你想過(guò)濾的話，建議你加原比例血清，因?yàn)镚ibco牛血清不會(huì)很容易通過(guò)濾膜。最主要的還是找到可能污染的原因。

　　3、問(wèn)：加好了Gibco牛血清雙抗的培養(yǎng)基由于污染了再過(guò)濾后還能用嗎？

　　答：建議不要用了。在加了雙抗的情況下已經(jīng)污染，那么細(xì)菌污染的可能性會(huì)較小了。一般的過(guò)濾除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。

　　4、問(wèn)：我準(zhǔn)備把使用的*1640培養(yǎng)液重新過(guò)濾一遍，不知道培養(yǎng)液中的血清成分是否能通過(guò)濾膜，過(guò)濾后是否還需要補(bǔ)充胎牛血清？如需又如何補(bǔ)充？

　　答：可以透過(guò)，但是隨著液體量的增多會(huì)很慢，如果不加壓會(huì)比較麻煩，還有最好用低蛋白吸附的，不然損失是比較大的。